پایان نامه کارشناسی ارشد در رشته زیست شناسی (فیزیولوژی جانوری)
اثرات لینالول بر الگوی فعالیت نورونی حلزون و بر همکنش با مکانیسم های سلولی دخیل در القای فعالیت صرعی
چکیده
لینالول، مونوترپن الکلی است که در اسانس روغنی تعدادی از گیاهان آروماتیک وجود دارد. این ترکیب اثرات ضد التهابی، ضد درد و انواعی از اثرات بیولوژیک بر سیستم عصبی را داراست. در تحقیق حاضر، ما تکنیک ثبت داخل سلولی۰/۱ ) به سرعت فرکانس mM) را برای مطالعه اثرات لینالول بر فعالیت نورونهای حلزون به کار بردیم. اعمال لینالول پتانسیلهای عمل خودبهخودی را افزایش و شیب فاز رپلاریزاسیون و دوره و دامنه پتانسیل هایپرپولاریزان متعاقب را کاهش داد. لینالول همچنین دامنه پتانسیل عمل را کاهش داد اما به نظر میرسد این تاثیر نتیجه دپلاریزاسیون آهسته غشاء باشد و نه مهار مستقیم کانالهای سدیمی زیرا با تثبیت ولتاژ استراحت غشاء در حدود کنترل (با تزریق مداوم ۰/۲ ) به تدریج الگوی فعالیت را از mM) جریان منفی) کاهش دامنه پتانسیلهای عمل هم حذف گردید. اعمال لینالول حالت منظم به فعالیت انفجاری تغییر داد که این الگوی فعالیت بعد از شستشو با رینگر نرمال به آهستگی برگشت پذیر کاهش و در حضور نیکل (L-type بود. فعالیت انفجاری در حضور نیفدیپین (مهارکننده اختصاصی کانالهای کلسیمی و کلریترین (A مهارکننده پروتئین کیناز ) H کلرید (مهارکننده غیر اختصاصی کانالهای کلسیمی) حذف شد. افزودن ۸۹
فعالیت انفجاری القاء شده توسط لینالول را حذف کرد و سبب بازگشت پتانسیلهای عمل (C (مهارکننده پروتئین کیناز منفرد و منظم شد. این نتایج پیشنهاد میکند لینالول میتواند فعالیت صرعی را بویژه از طریق مهار کانالهای پتاسیمی در نورونهای حلزون القاء نماید. به نظر میرسد تاثیر مستقیم لینالول بر کانالهای یونی در تغییر فعالیت نورونها نقش داشته باشد که با شروع سریع تاثیر لینالول مطابقت دارد، اما با توجه به تاثیر مهارکنندههای پروتئین کینازها این تاثیر به تعدیل غیرمستقیم از طریق فسفریلاسیون کانالهای یونی نیز وابسته است.
کلمات کلیدی: پتانسیل عمل، لینالول، نورون حلزون، فعالیت انفجاری، کانال های یونی
فهرست مطالب
فصل اول: مقدمه
۱-۱) بیان مساله ۲
۱-۲) دلایل استفاده از نورونهای حلزون ۵
فصل دوم: مروری بر تحقیقات پیشین
۲-۱) صرع ۸
۲-۲) اسانسهای گیاهی ۹
۲-۳) اثرات بیولوژیک اسانسهای گیاهی ۱۰
۲-۳-۲ )اثرات موتاژنیک اسانسها در سطح هسته و سیتوپلاسم۱۰
۳-۳-۲)اثرات انتی موتانژنیک اسانسها.۱۰
۴-۳-۲ ) اثرات سرطانزایی اسانسها.۱۱
۴-۲) ترکیبات اسانسها و عملکرد آنها روی سیستم عصبی مرکزی و محیطی ۱۱
۱-۴-۲) اکالیپتول ۱۲
۲-۴-۲)اوجنول ۱۳
۳-۴-۲)منتول ۱۳
۴-۴-۲)سیترونلول ۱۴
۵-۴-۲) لینالول ۱۵
۲-۵) کانالهای یونی و مشارکت آنها در فعالیت الکتریکی نورونها ۱۷
۲-۵-۱) کانالهای کلسیمی ۱۷
۲-۵-۲) کانالهای پتاسیمی۱۹
۲-۵-۲-۱) کانالهای پتاسیمی وابسته به ولتاژ ۱۹
۲-۵-۲-۲) کانالهای پتاسیمی وابسته به کلسیم ۲۰
۲-۵-۳) کانالهای سدیمی ۲۱
۲-۵-۳-۱) جریانهای سدیمی گذرا و مداوم ..۲۲
۶-۲) تعدیل کانال های یونی توسط فسفوریلاسیون ۲۳
۱-۶-۲)گیرنده متابوتروپیک.۲۳
۷-۲ )پروتئین کینازها..۲۵
۲-۷-۱) PKA و اثر بر کانالهای یونی ۲۵
۲-۷-۲) PKC و اثر بر کانالهای یونی.... ۲۷
فصل سوم: مواد و روشها
۳-۱) حیوانات . ۳۰
۳-۲) تشریح و آماده سازی گانگلیون عصبی جهت ثبت ... ۳۰
۳-۳) محلولها و داروها .. ۳۱
۳-۴) ثبت داخل سلولی ۳۲
۳-۵) مراحل آزمایش ... ۳۴
۳-۶) پارامترهای الکتروفیزیولوژیک مورد مطالعه ۳۴
۳-۷) آزمون آماری ۳۶
فصل چهارم: نتایج
۴-۱) ویژگیهای فعالیت خودبخودی و برانگیخته نورونهای حلزون در شرایط کنترل ۳۸
۲-۴)اثرات غلظت های ۰/۱ و ۰/۲ میلی مولار لینالول بر ویژگیهای الکتروفیزیولوژیک نورونهای حلزون ۳۹
۱-۲-۴) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبهخودی در حضور لینالول ۰/۱ میلی مولار ۳۹
۲-۲-۴) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول ۰/۲ میلی مولار ۴۷
۳-۴) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول و مهار کننده‌های کانالهای کلسیمی نیکل کلرید و نیفدیپین .... ۵۱
۴-۴) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول و مهار کننده‌های پروتئین کینازها کلریترین و H89 ...53
فصل پنجم: بحث و نتیجهگیری
۵-۱) بحث .... ۵۸
۵-۱-۱ ) تغییر در ویژگی های پتانسیل عمل در حضور لینالول....۵۷
۵-۱-۲ ) تغییر در فعالیت نورونی و بروز الگوی burst در حضور لینالول...۶۰
۵-۲) نتیجه گیری ..... ۶۳
۵-۳) پیشنهادات برای مطالعات آینده .... ۶۴
فهرست منابع و ماخذ .. ۶۵
فهرست شکلها
عنوان صفحه
شکل ۳-۱٫ حلزون باغی ۳۰
شکل ۳-۲٫ گانگلیون تحت مری تثبیت شده در محفظه ثبت ۳۱
شکل ۳-۳٫ نمایی از وسایل ثبت داخل سلولی ۳۳
شکل ۳-۴٫ نحوه اندازه گیری برخی پارامترهای پتانسیل عمل ۳۵
شکل ۴-۱٫ الگوی فعالیت خودبخودی نورون در شرایط کنترل، ۵ و ۱۰ دقیقه پس از مجاورت با غلظت ۰/۱ میلی مولار لینالول ۴۰
شکل ۴-۲٫ مقایسه پتانسیل ثبت شده از یک نورون در سه زمان کنترل، ۵ و ۱۰ دقیقه پس از افزودن لینالول ۴۲
شکل ۴-۳٫ الگوی فعالیت خودبخودی در شرایط کنترل، ۵ دقیقه پس از مجاورت با غلظت ۰/۲ میلی مولار و پس از شستشوی محفظه حاوی لینالول با رینگر نرمال حلزون ۴۸
...............
